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- 2025年07月07日
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文献和实验signaling公司的Phospho-PI3K p85 (Tyr458)/p55(Tyr199) 我自己分析没有条带无非是细胞状态不好，或者抗体不好，不知道还有没有可能是没有加磷酸化酶抑制剂，以至于磷酸化的蛋白被去磷酸化了？ 谢谢啦～ yhwangcams 检测内参蛋白如GAPDH,ACTIN,TUBULIN是否成功？ 用PLB裂解细胞得到的蛋白适合做REPORTER，做WESTERN不太合适。建议可以用其他BUFFER裂解蛋白。
Using Phospho‐Motif Antibodies to Determine Kinase Substrates
Figure 18.20.1 The specificity of phospho‐motif antibodies. HeLa cells were serum‐starved for 24 hr prior to being stimulated with 50 ng/ml IGF‐1 or 100 nM PMA for 10 min. Lysates were immunoblotted with anti‐Akt/PKB phospho‐motif (left panel
at 10, 25, and 50 μM). At 24 h post-treatment, celllysates were obtained; SDS-PAGE and Western blotting were performed as described in Section 3, Methods. AR-A014418dose-dependent decreases of phospho-β-catenin (Ser33/37) and phospho-glycogen synthase
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