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文献和实验,在中性和弱碱性条件下可以和固定化的金属离子相互作用(如Ni离子,Zn离子,Co离子等),从而达到纯化蛋白的目的。此系统的洗脱方式可以用过三种非特异性步骤达成: 降低pH(4.5-6) b. 加入EDTA C.不同浓度咪唑溶液(20-250mM) 当蛋白洗脱完毕后,使用EDTA使纯化树脂与金属离子分离,即可完成树脂的再生。 Strep-tag®则是基于链霉亲和素(Streptavidin)和生物素这一自然的相互作用,将Strep-tag®II(WSHPQFEK)或Twin-Strep-tag®
-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys) 可放在N- 或 C-terminus 不影响蛋白折叠和功能,无需移除 分子量 1058Da Twin-Strep-tag® (也有叫做双Strep-tag®II) 28 aa 标签(WSHPQFEK-GGGSGGGSGG-SA-WSHPQFEK) 两段Strep-tag®II标签序列 较Strep-tag®II对于Strep-Tactin®有更高亲和力 分子量 2887Da 二者均为小标签,不会对蛋白质的结构和功能活性产生影响,因此通常不需要在纯化
IBA 第三代 Strep-tag® 高效蛋白纯化系统,由 Twin-Strep-tag® 搭配全新研发出的 Strep-Tactin®XT 组合而成。在此系统中,Strep-Tactin®XT 与 Twin-Strep-tag® 的亲和力提升至 pM 的范围,与 Strep-tag®II 的亲和力也已升至 nM 的范围。 亲和力大幅改善,其间的链结仍保有可逆性,纯化过程同样温和。仅需简单直接的再生步骤,填料即可重复利用。Strep-Tactin®XT 提升的亲和力能确保您在温和的生理纯化条件
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