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文献和实验底物范围较广,包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB,0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3% (W
问:有没有做辣根过氧化物标记的朋友啊,能不能把你们的步骤发给我。本人开始做,发现很多人用的浓度都不一样。答:1.1 试剂准备1) 10mg/mL HRP2) 0.06mol/L NaIO43) 0.16mol/L乙二醇4) 碳酸盐缓冲液(Na2CO3 0.7952g NaHCO3 1.4702g 溶于500mL蒸馏水中,调pH值到9.5)5) 2.5mg/mL NaBH46) 0.01mol/L磷酸盐缓冲液,pH7.41.2 操作步骤1. 10mg/mL取HRP VmL,溶液为棕黄色,加入
(W/V)氯化镍/水贮存液; 30%过氧化氢; DPX。 光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果) 2.操作步骤 (1)用9ml 0.05mol/L Tris缓冲液(pH7.6)溶解6mgDAB; (2)加lml 0.3%(W/V)氯化镍/水贮存液(也可以用等量的氯化钴替代); (3)加0.1 m1 3%过氧化氢。过氧化氢一般以30%的溶液提供,贮存在4E,此条件可以持续1个月; (4)如果出现沉淀,用滤纸过滤; (5)加
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