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文献和实验当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般最多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体,也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark
流式课堂 | 易被忽略的 CD4、CD8 共表达细胞——胸腺淋巴细胞
做过流式实验的同学,对 CD4、CD8 这两个指标都不会陌生。检测 CD4+ T 细胞和 CD8+ T 细胞分型,是流式中最常见的实验之一。 通常,我们会先检测 CD3,来圈总T淋巴细胞,再分别用 CD4 抗体和 CD8 抗体,来区分 CD4+ T 淋巴细胞(辅助或调节性T细胞)和 CD8+ T 淋巴细胞(细胞毒性 T 细胞)。 新生小鼠脾脏细胞 上图为新生小鼠脾脏细胞进行的 CD3-PE、CD4-FITC、CD8-APC 三色流式实验结果。从图中可以看出,在新生小鼠脾脏中,绝大
,IL-10则下调PBMC中树突状细胞CD86的表达。CD80/CD86皆通过其胞膜外区V样结构域结合受体CD28和CDl52(CTLA-4)。功能参见CD28/CDl25部分。 B7家族的其他成员 B细胞和APC上除表达B7―1(CDS0)和137-2(CD86)以外,还有几种B7家族新的成员。 ①ICOS-L,即B7-H2(CD275),与]37-1和B7-2约有20%同源性。ICOS―l在淋巴滤泡中的B细胞表达水平最高,ICOS―L
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