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文献和实验果糖才是肥胖的真凶?Nature 最新文章揭示高果糖饮食如何
,丙酮酸与磷酸烯醇丙酮酸(PEP)的比例显著降低,与丙酮酸激酶的抑制效果一致。此外,PKM2 在缺氧组织中的表达很高,例如肿瘤和肠绒毛等。图片来源:Nature果糖主要由糖转运蛋白 GLUT5 转运到肠细胞中,然后被 KHK 磷酸化形成 1-磷酸果糖(F1P)。由于 F1P 在结构上类似于 PKM2 的内源性调节因子 1,6-二磷酸果糖(FBP),因此作者假设 F1P 可能直接抑制 PKM2 的活性。研究发现,F1P 会与 FBP 竞争结合 PKM2 的同一位点,而且一旦结合就能够直接抑制 PKM
加入保护碱基。保护碱基的查找见 http://blog.sina.com.cn/s/blog_7188922f0100xa75.html。尽量选择分数较高的保护碱基。以 PKM2 基因为例,设计引物,首先查找它的序列,进入 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/。选择目的基因的种属来源。选择目的基因的亚型。查找到目的基因的 CDS 序列,以 FASTA 格式导出。那么 PKM2 上下游引物分别为:设计好引物后,通过 PCR 方法扩增目的基因,随后胶回收,同样使用 spe
: 1. Prepare Whole Cell Extract. Make sure every solution DOES NOT contain DTT. 2. Add 1 or 2 μl of non-diluted monoclonal antibody (4B4 is better than 10H8 for HSF1) or 1/10 diluted polyclonal antibody to 10 μg of whole cell extract
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