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文献和实验antibody dilution buffer: TBS-T supplemented with2% (w/v) BSA. 6. Antibodies: Phospho-b-catenin Ser33/Ser37/Thr41, phospho-glycogen synthase Ser641, and glycogen synthase (CellSignaling Technologies, Beverly, MA); b-catenin and GSK-3b(BD PharMingen, San
下调不能说明活性降低,因为决定GSK3-beta的活性的还与其磷酸化的比例和磷酸化的位点有关。所以你除了要做GSK3-beta总的蛋白表达之外,还要做磷酸化的GSK3-beta的蛋白表达。 (2)应该活性形式和非活性形式都做。一般来讲,GSK3-beta在Ser9位点磷酸化之后活性收到抑制,而在216位点磷酸化之后,其活性收到加强。因此建议将GSK3-beta的两个磷酸化位点都做了,另外还要同时检测GSK3-beta的总蛋白表达,这样才能全面的说明问题。
[3] 。但据报道,MCF-7 人乳腺癌细胞系中,因在 CASP-3 基因 exon 3 中存在 47bp 的缺失而不表达 caspase 3 蛋白[4] 。前体形式的 caspase-3 由一个前端功能区(prodomain)和一大一小两个催化亚单位构成。在特定的刺激比如配体受体互作、生长因子匮乏和细胞功能抑制剂等的作用下,未活化的酶原形式的 caspase-3 在 Asp-28/Ser-29(N 端功能前区)以及 Asp-175/Ser-176(大小亚基之间)被剪切活化,转变为活化的 p17 大亚
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