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文献和实验[2]。 NEDD8 修饰的反应过程 NEDD8 修饰过程具体如下:(学霸自行跳过本段)成熟的 NEDD8 分子可以通过其 C 端的甘氨酸与 UBA3 半胱氨酸活性位点形成一个高能量的硫酯键,UBA3 是 NEDD8 活化酶(E1)(APPBP1 和 UBA3 组成的异源二聚体)的催化亚单位且具有 ATP 依赖性。而后,活化的 NEDD8 被转移到 UBC12 的半胱氨酸活性位点并形成硫酯键;最后,NEDD8 与底物的赖氨酸残基形成异肽键,底物的去 Neddylation
: 1. Prepare Whole Cell Extract. Make sure every solution DOES NOT contain DTT. 2. Add 1 or 2 μl of non-diluted monoclonal antibody (4B4 is better than 10H8 for HSF1) or 1/10 diluted polyclonal antibody to 10 μg of whole cell extract
Western Analysis of Transgenic Plants
are transferred to a solid support, which is normally nitrocellulose or polyvinylidene fluoride (PVDF [Millipore, Bedford, MA]). Immunological detection of proteins transferred to a solid support combines ease of handling with accessibility of antibodies
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