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- 赛默飞（Thermo Fisher）
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- 2025年06月30日
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文献和实验Generation of Poly(ADP-ribosyl)ation Deficient Mutants of the Transcription Factor, CTCF
of the PARylation mark. The latter was achieved by ectopic expression of mutated proteins in cells, followed by immunoprecipitation with the polyclonal anti-PAR antibody and Western analysis with a protein-specific antibody. The PARylation-deficient CTCF mutant
聚集成 CpG 岛（CCIs），50% 以上的基因启动子都含 CCIs，一般都集中在转录起始位点。甲基的存在导致了转录过程终止，从而使这些基因沉默。其机制主要与转录因子 CTCF（CCCTC binding factor）蛋白和甲基 CpG 结合蛋白（MBP）有关。CTCF 可以控制染色质三维结构的改变，促进或抑制不同位点的基因表达，但 CTCF 不能与甲基化CpG 结合，MBP 含有甲基化 CpGs 结合域，同时能与组蛋白去乙酰化酶（HDAC）结合，可重构染色质并抑制转录。 图
: 1. Prepare Whole Cell Extract. Make sure every solution DOES NOT contain DTT. 2. Add 1 or 2 μl of non-diluted monoclonal antibody (4B4 is better than 10H8 for HSF1) or 1/10 diluted polyclonal antibody to 10 μg of whole cell extract
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