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文献和实验DNA随分裂活动发生渐进性缩短的趋势受到阻遏,使正常细胞转化成具有无限分裂能力的永生化恶性细胞。 研究表明,端粒DNA在与端粒蛋白共同作用下自身回折,在染色体的末端形成一个大的DNA套索结构,即t-环(telomere loop)。目前已知人的端粒功能需要两个特殊的端粒结合蛋白TRF1(telomeric repeat binding factor 1)和TRF2。TRF2起到保护染色体末端的作用,TRF1参与调节端粒的长度。在端粒酶阳性的细胞中过表达TRF1导致端粒长度的缩短,而抑制
: 1. Prepare Whole Cell Extract. Make sure every solution DOES NOT contain DTT. 2. Add 1 or 2 μl of non-diluted monoclonal antibody (4B4 is better than 10H8 for HSF1) or 1/10 diluted polyclonal antibody to 10 μg of whole cell extract
Fluorescence Recovery After Photobleaching (FRAP) to Study Nuclear Protein Dynamics in Living Cells
, and of two DNA-maintenance factors, the telomere binding proteins TRF1 and TRF2. We also provide protocols for qualitative FRAP analysis and a general scheme for computer modelling of the presented FRAP procedures that can be used to quantitatively analyse
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