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文献和实验Measurement of Autophagy in Cells and Tissues
3 by immunoblotting or immunofluorescence has become a reliable method for monitoring autophagy. When autophagy is impaired, the level of p62/SQSTM1, a ubiquitin- and LC3-binding protein, is increased in addition to the accumulation of ubiquitinated proteins
5. Electorophoresis with 100-130 V in 0.25X TBE buffer for 3 hours. You may use 18 cm-height gel system and stop running after dye front comes to 12 cm point from the top. When a gel was run with 130 V, the current was less than 20 mA. You could run a gel
重磅综述:年发文量近 10000,自噬领域第 4 版研究指南发布
蛋白质使用相同的名称但不用斜体如 ULK1,而突变体则命名为 ULK1−/−。 第二,详细枚举整理了自噬的监测方法;指南列举了目前监测自噬几乎全部的方法,如①可通过透射电子显微镜观察到自噬体的形态结构,对所测自噬体大小和数量的计算推断自噬活性的强弱;②可对 Atg8 家族蛋白的检测与定量分析,Atg8 和 Atg8 家族蛋白是最广泛监测的自噬相关蛋白。本指南详细综述了利用这些蛋白质的多种分析方法;③通过 SQSTM1/p62 结合 LC3 蛋白翻转实验评价自噬流强弱;④对 TOR/MTOR, AMPK
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