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- 赛默飞（Thermo Fisher）
- MA515234
- 2025年07月10日
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D 68KDA)
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文献和实验血管 蛋白名称（可保密）：保密 蛋白分子量：140 kd WB用膜类型、孔径：0.45pvdf 转膜方式（恒压、恒流）：恒流，200 mA 转膜时间：210 min 转膜设备:湿转,北京六一 蛋白来源：心肌 蛋白名称（可保密）： 蛋白分子量：90 kDa，70 kDa,12.6 kDa WB用膜类型、孔径：NC 转膜方式（恒压、恒流）：恒压 转膜时间：70 v 240 min，120 min，60
WB 用膜类型、孔径：PVDF 膜 转膜方式（恒压、恒流）：350 mA 恒流 转膜时间：150 min 转膜设备：湿转 Bio-Rad 说明：相同条件曾用于数个 30-70 KDa 的蛋白，都能成功转上，不过没有试缩短时间效果如何； 实验时没为转膜条件苦恼，倒是电泳时胶的浓度及时间根据不同分子量而有区别。 蛋白来源：成纤维细胞 蛋白名称：smad3 蛋白分子量：54 KDa
量较大（如细胞蛋白通常上样在 20-30 甚至 40 ul），可适当减小电压跑 20-30 min，待压齐后方可开始分离。 转膜 该环节电流的大小，转膜的时间决定是否能成功将蛋白转上，而具体的参数应取决于所要蛋白的分子量大小，应反复摸索，本人在实验中得出的经验为：10 KDa：200 mA 1 h，60 KDa 70 V，2 h，90 KDa 70 V，4 h，200 KDa 70 V，6 h。 此外还有如下几个细节问题需要注意： 膜的选择：PVDF
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