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- 赛默飞（Thermo Fisher）
- MA172531
- 2025年07月15日
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文献和实验: 1. Prepare Whole Cell Extract. Make sure every solution DOES NOT contain DTT. 2. Add 1 or 2 μl of non-diluted monoclonal antibody (4B4 is better than 10H8 for HSF1) or 1/10 diluted polyclonal antibody to 10 μg of whole cell extract
收集在AnchorChip，并进行作质谱分析，用自动化Mascot进行数据搜索。结果 大部分视网膜蛋白可以在Tris缓冲液（EB1）及进一步的含尿素及CHAPS（分别含量为70%和28%）的缓冲液（EB2）中溶解。只有很少视网膜蛋白可溶解在SDS缓冲液（EB4）中。在2-D电泳中分离出的蛋白质特性与在EB1及EB2中分离出的蛋白质特性相似。很少部分的蛋白质只能经EB2萃取后经2-D电泳分离到。在机器自动化蛋白质分析鉴定中，总的成功检出率为67.8%。特别是那些有较好MS谱图的蛋白分子有着更高的检出率（>90%）。已鉴定
Reconstitution and Quantification of Dynamic Microtubule End Tracking In Vitro Using TIRF Microscopy
. Here, we describe the purification of EB1 and CLIP-170, the total internal reflection fluorescence microscopy assay to observe dynamic end tracking in vitro, and the quantitative analysis of fluorescent +TIP comet shape and of single +TIP molecule turnover at growing microtubule
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