MO CD274 MIH5 NY 700 KIT- MAB-

生物芯片实验手册（NIH）

, MD) .dATP, dCTP, dGTP, dTTP, 100 mM each #27-2035-02, store frozen, -20°C (Pharmacia, Peapack, NJ) PCR primer AEK M13F (5'-GTTGTAAAACGACGGCCAGTG-3') and AEK M13R (5'-CACACAGGAAACAGCTATG-3') at 1 mM concentration, store frozen, -20°C 10X PCR

Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆

代，这意味着在固体培养基上生长可以加快最高克隆的选择效率。 14. 这个阶段我们推荐使用 QIAprep spin kit，因为用碱裂解法在 BL21 PREP4 中提的质粒质量不够好。另外，提质粒时用 QiagenPB  Buffer 洗 1 次柱子。 15. 第 2、第 3 步免去了测序前检查细胞中是否含有正确质粒的必要。本例中按此程序处理的 700 个菌落中含有pQE-32 ras-F[ 3 ] 或 pREP4 质粒。 16. PCR 反映 2 和 3 中所用的 3' 引物相同