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文献和实验LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
的定量。 更多有关特定CpG位点的甲基化的详细信息,可采用重亚硫酸氢盐修饰后测序分析。 LightCycler主要应用:实时荧光PCR技术进行快速准确的DNA甲基化分析 我们使用罗氏诊断公司的LightCycler®480高分辨熔解扩增试剂盒在LightCycler®480实时荧光PCR仪上,通过MS-HRM测定法对两种已知的经过启动子(FANCE和MGMT)甲基化的DNA修复基因的检测性能。 材料和方法 将多种细胞株的DNA样本作为检测模板。每μg的每种DNA样本都经过重亚硫酸盐修饰
Epigenetic Markers of Early Tumor Development
stages of mammary gland tumorigenesis and have been suggested to be included in the models that evaluate individual breast cancer risk. In lung cancer, P16INK4a and MGMT gene hypermethylation was observed in sputum years before clinical manifestation
用药。 MGMT基因在许多肿瘤中被认为是抗肿瘤药物治疗的预测标记。MGMT启动子肿瘤特异性甲基化,可以抑制MGMT蛋白的活性,从而使得肿瘤细胞对烷化类的抗肿瘤药物敏感,因而被广泛用于肿瘤化疗治疗。 目前,甲基化检测的方法很多,例如甲基化特异性PCR,Northern印迹法、Western印迹法、免疫细胞化学等,这些检测方法由于需要花费大量时间,成本高等等,在临床推广应用时均存在一定的困难。最新报道了一种基于熔解曲线的高分辨率熔解(High Resolution Melt,HRM)的新方法,为甲基化的检测带来
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