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文献和实验and the supernatant discarded) twice with Solution A (1.2 M sorbitol, 50 mM KPO4, pH 7). To spheroplast, cells are resupended in 500 ul of Solution A containing 0.1 b-mercaptoethanol, 0.02 glusulase and 5ug/ml zymolyase. The suspension is incubated at 37oC
then recovered and the supernatant discarded) twice with Solution A (1.2 M sorbitol, 50 mM KPO4, pH 7). To spheroplast, cells are resupended in 500 ul of Solution A containing 0.1% b-mercaptoethanol, 0.02% glusulase and 5ug/ml zymolyase. The suspension
沉淀中加500 mL的细胞裂解液(10 g/L Np40, 20 mmol/L EDTA, 50 mmol/L Tris-HCl(pH 7.5)]和10 mL蛋白酶K. 在56℃水浴中加热1-2 h, 用苯酚和氯仿提取, 然后用脱水酒精沉淀DNA. 在700 mL/L酒精洗涤一次后加入200 mL TE. 然后再加入RNA酶(最终浓度为50 mL/L), 37℃下过夜. 然后在10 1.3 DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 1×106细胞在含50μg/ml顺铂的培养液中培养12
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