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文献和实验Intracellular Cytokine Staining Protocol
TimeRestimulationIntracellular BlockAntibodyIL-1aNEW!mouse PECmINFg (100ng/ml)(2h4)/LPS (100ng/ml)(22hr)2hr/22hr-MonensinALF-161IL-1bNEW!mouse PECmINFg (100ng/ml)(2h4)/LPS (100ng/ml)(22hr)2hr/22hr-MonensinB122IL-2mouse spleenConA (3ug/ml) (2d)/IL-2 (20ng/ml)+IL-4 (20ng/ml) (3d
和稳定AKP 的作用。匀浆中加入正丁醇可使部分杂蛋白变性,释出膜中酶,过滤后,以去除杂蛋白。含有AKP 的滤液用冷丙酮和冷乙酸进行重复分离纯化。根据AKP 在33%的丙酮或30%的乙醇中溶解,而在50%的丙酮或60%的乙酸中不溶解的性质,用冷丙酮和冷乙醇重复分离提取,可从含有AKP 的滤液中获得较为纯净的碱性磷酸酶。 用有机溶剂分离纯化酶(或蛋白质)必须注意以下几点: (1)有机溶剂沉淀是个放热过程,所以要在低温下进行。溶剂应预冷,加入时要边搅拌边滴加,以避免局部浓度过高使酶
Intracellular Cytokine Staining Protocol
(100ng/ml)(22hr) 2hr/22hr - Monensin B122 IL-2 mouse spleen ConA (3ug/ml) (2d)/IL-2 (20ng/ml)+IL-4 (20ng/ml) (3d) 2d/3d anti-CD3 (10ug/ml immobilized
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