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文献和实验The OP9-DL1 System: Generation of T-Lymphocytes from Embryonic or Hematopoietic Stem Cells In Vitro
, passage the cells more sparsely ( Fig. 1a ). Freezing ESCs 25. Passage the ESCs as described in Step 22. Resuspend the cells in 3 mL of freezing medium for OP9 cells. 26. Aliquot 1 mL of cell suspension per cryovial (~3-6 x
STANDARD PLANT MOLECULAR BIOLOGY PROTOCOLS
in microfuge. Aliquot about 450ul to a fresh tube. Freeze in lN2 and store -80C. Fluorometric GUS Mix pr assay 125u1 2 x MUG amd 50u1 100% Methanol prewarm at 37C and at t0 add 75ul extract, mix. When all have been done (up to 50) take out 50
在小鼠,可使用纯化的FcII/III受体的抗体(CD16/32),按照1ug/106细胞的用量,在染色缓冲液中4℃孵育15分钟,PBS清洗后,直接进行下一步染色。②对于人和大鼠,可直接使用过量的与荧光抗体相同来源和亚型不相关的纯化Ig或者血清进行阻断3、细胞表面染色① 加适当的细胞表面染色试剂② 加入溶血素,室温暗处孵育10分钟。(注意:PMA激活的全血可能会溶血不完全。)③离心500g 5分钟,弃上清4、固定和破膜① 加固定剂,室温暗处孵育15分钟,离心500g 5分钟,弃上清;② 加破膜剂温暗处
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