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- 赛默飞（Thermo Fisher）
- 16-0281-85
- 2025年07月09日
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500UG
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文献和实验分钟收集细胞； 5. 将上一步离心得到的细胞沉淀，重悬至扩增培养基中，并进行计数。 1.3 细胞刺激（次日） 扩增培养基成分：RPMI1640 + 10% 血清 + 5ug/ml anti-mouse CD28（克隆号：37.51） + 双抗 1. 将细胞浓度调整至 1-2×10^6/ml（本次实验为 2×10^6/ml，该浓度偏大）； 2. 从 4°C 冰箱取出前一天包被的板子，弃掉包被液，无菌PBS洗涤3遍； 3. 每孔加入 500μl 细胞悬液，放置于 37°C 含 5% CO2 细胞
Dual- and Triple-Color Fluorospot
labeled with green fluorophore emitting light at the same wavelength as FITC, streptavidin (SA) labeled with Cy3, and if three cytokines are analyzed, a mouse anti-tag mAb labeled with Cy5 (Mabtech). 5. Mouse mAb anti-human CD28 at 0.1 mg/ml
Intracellular Cytokine Staining Protocol
)2d/3danti-CD3 (10ug/ml immobilized)+anti-CD28 (2ug/ml soluble) 5hrMonensinJES6-5H4IL-4mouse spleenConA (3ug/ml) (2d)/IL-2 (20ng/ml)+IL-4 (20ng/ml) (3d)2d/3danti-CD3 (10ug/ml immobilized)+anti-CD28 (2ug/ml soluble) 5hrMonensinBVD6-24G2IL-6mouse
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