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- 赛默飞（Thermo Fisher）
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- 2025年07月12日
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文献和实验® TACS Agarose Column, 1 ml（Cat.no 6 - 6310 - 001） 10x Buffer CI, 85 ml （Cat.no 6 - 6320 - 085） Anti-hu CD235a Biotin mAb Anti-hu CD14 Biotin mAb Anti-hu CD3 Biotin mAb
基磺酰氟0.1mM。蔗糖20%（g/v），氯化钠200mM，过滤灭菌，100ml培养物/5ml细菌周质腔蛋白提取液），振荡混匀，置于4℃轻摇1小时，12000rpm，4℃离心20分钟，取上清。将提取物用PBS透析过夜，在FPLC上，用0.01M PBS pH7.4平衡Protein G Agarose 亲和层析柱，上样，先用0.01M PBS pH7.4平衡，至基线稳定后，用0.1M pH2.8甘氨酸缓冲液洗脱，收集洗脱液。7、Fab和F（ab）2竞争免疫荧光结合实验将浓度为4ug/ul的HI47溶液与1106
mAb的介导与人淋巴细胞结合。在荧光显微镜下，结合有荧光素标记抗体的细胞在黑暗背景下发出荧光，凡是呈现特异性荧光的细胞即为阳性细胞，计数阳性细胞，从而确定T细胞各亚群的百分率。上述方法分别称为直接免疫荧光法和间接免疫荧光法。 【试剂及材料】 （1）肝素钠溶液:浓度为125～250U/ml。 （2）抗CD3、CD4、CD8的mAb （3）Hanks液和RPMI-1640营养液 （4）FITC-兔或羊抗鼠IgG （5） 荧光显微镜 【操作方法】 （1） 取
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