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文献和实验1X4 , 5ml X 3 ( 5 )容量瓶: 100m1 X 2 ( 6 )漏斗 ( 7 )研钵 ( 8 )电子顶载天平 2 .试剂 ( 1) 铜试剂 1 ) 4 % CuS0 4 ・ 5H 2 0 2) 称取 24g 无水碳酸钠,用 850m1 水溶于大烧杯中,加 120g 含 4 分子结晶水的酒石酸钾钠,待全溶(可适当加热)后加入碳酸氢钠 16g, 再加入 120g 无水硫酸钠,全溶及冷却后加水至 900m1 ,沉淀 1~2 天,取上清液(要求严格时过滤)即可备用。使用
RLCS (Restriction Landmark cDNA Scanning) Protocol
and transfer supernatant containing mRNA to a new RNase-free tube. 15 Repeat 11 - 14 until there is no longer lysate. Extracted mRNA concentration is 100 - 120 ug/mL. Solution volume is 100 ul. A total of 10-12 ug mRNA may be obtained
-HCl pH 8.5 (dilute from 1 M stock), 1.5 mM MgCl2 (dilute from 1 M stock), 0.2 mM of each dNTP (dilute from 100 mM stock), and 5 units of PE-Cetus Amplitaq in 0.5 ml snap cap tubes for 25 cycles of 95oC for 1 min., 55oC for 1 min. and 72oC for 2 min
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