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- 赛默飞（Thermo Fisher）
- 11-0454-85
- 2025年07月12日
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文献和实验mmol/L NaCl，5mmol/L CaCl2 标记液：将FITC- Annexin V（宝灵曼公司产品）和PI加入到孵育缓冲液中，终浓度均为1ug/ml 流式细胞仪 实验步骤 1.细胞收集：悬浮细胞直接收集到10ml的离心管中，每样本细胞数为（1~5）×106，/mL 500~1000r/min离心5min，弃去培养液。 2.用孵育缓冲液洗涤1次，500~1000r/min离心5min。 3.用100ul的标记溶液重悬细胞，室温下避光孵育10~15min。 4.500~1000r
，PI能够透过细胞膜而使细核红染。因此将Annexin-V与PI匹配使用，就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。 方法 1、悬浮细胞的染色：将正常培养和诱导凋亡的悬浮细胞（0.5~1×106）用PBS洗2次，加入100ul Binding Buffer和FITC标记的Annexin-V（20ug/ml）10ul，室温避光30min，再加入PI（50ug/ml）5ul，避光反应5min后，加入400ul Binding Buffer，立即用FACScan进行流式细胞术定量检测（一般不超过
；或丙酮-甲醛固定液：Na2HPO4 100mg，KH2PO4 500mg，蒸馏水150ml，丙酮225ml，甲醛125ml；或丙酮-甲醛溶液（1;1）；或-20℃甲醇。 k. 聚苯乙烯微孔板：40孔、96孔、或条孔；硬板或软板均可使用。 l. 酶联免疫阅读仪；或光镜。 m. 吸管、加样器及水浴箱、离心机等。 B、 可溶性抗原的酶联免疫吸附试验（ELISA） a. 纯化抗原用包被液稀释至1-20ug/ml。 b. 以50-100
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