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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 英文名:
BsR-T7/5
- 年限:
1天(1D)
- 细胞形态:
成纤维样细胞(Fibroblast-like)
- 物种来源:
金黄地鼠(Mesocricetus auratus)
- 相关疾病:
贴壁生长(Adherent)
- 组织来源:
肾(Kidney)
- 规格:
T25/冻存管
BHK-21 [BsR-T7/5] 细胞是一种经过特殊工程改造的仓鼠肾细胞系,其亲本为广泛应用的BHK-21(幼年仓鼠肾细胞)。该细胞系的核心特征在于其稳定表达T7 RNA聚合酶,并且该聚合酶的转录活性受人巨细胞病毒主要立即早期启动子/增强子的严格控制。
这一独特的基因工程改造使其成为病毒拯救和重组蛋白高效表达领域的强大工具,尤其是在反向遗传学系统中。当将含有目的基因(其前方带有T7启动子)的质粒转染进该细胞后,细胞内的T7 RNA聚合酶会高效转录出目的基因的RNA,从而直接启动病毒(如流感病毒、冠状病毒等)的拯救流程,或大量表达目标蛋白。因此,BHK-21 [BsR-T7/5] 被广泛应用于病毒学基础研究、疫苗开发(特别是病毒载体疫苗和减毒活疫苗)、病毒-宿主相互作用机制探究以及外源基因的功能研究,极大地简化并加速了相关操作的进程。
| 细胞名称 | BHK-21金黄地鼠肾细胞(表达T7-5RNA聚合酶启动子) |
| 英文名称 | BsR-T7/5 |
| 规格 | T25/冻存管 |
| 货号 | CTCC-001-1018 |
| 种属 | 金黄地鼠(Mesocricetus auratus) |
| 组织来源 | 肾(Kidney) |
| 疾病 | 未知(Unknown) |
| 性别 | 雄性(Male) |
| 年龄 | 1天(1D) |
| 培养体系 | 该细胞系培养所用基本培养基为 RPMI-1640,配置完全培养基时需加入 10%FBS,1%Anti-Anti。 |
| 细胞形态 | 成纤维样细胞(Fibroblast-like) |
| 生长特性 | 贴壁生长(Adherent) |
细胞图片


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文献和实验体启动子的情形下,大肠杆菌宿主本身基因的 转录竞争不过T7噬菌体转录体系,最终受T7噬菌体启动子控制的基因 的转录能达到很高的水平。 T7噬菌体启动子的转录完全依赖于T7 RNA聚合酶,因此T7 RNA聚 合酶的转录调控模式就决定了表达系统的调控方式。噬菌体DE3是λ噬 菌体的衍生株,一段含有lacⅠ,lacUV5启动子和T7 RNA聚合酶基因的 DNA片段倍插入其int基因中,用噬菌体DE3的溶源菌,如BL21(DE3)、 HMS174(DE3)等作为表达载体 的宿主
pET 系统是在大肠杆菌中克隆和表达重组蛋白的最强大系统。根据最初由 Studier 等开发的 T7 启动子驱动系统, Novagen 的 pET 系统已用于表达成千上万种不同蛋白。 控制基础表达水平 pET 系统提供 6 种载体 - 宿主菌组合,能够调节基础表达水平以优化目标基因的表达。没有单一策略或条件适用于所有目标蛋白,所以进行优化选择是必要的。 宿主菌株 质粒在非表达宿主菌中构建完成后,通常转化到一个带有 T7 RNA 聚合酶基因的宿主
相关,不同的载体是不一样的。一个载体可只看它的启动子到终止子那一段,其它的可以考虑少些。 pET 表达菌株的相关信息 ( DE3 )指宿主为 λ DE3 溶原菌,其染色体上带有一拷贝由 lacUV5 启动子控制的 T7 RNA 聚合酶基因。这类菌株适用于从克隆到 pET 载体的目标基因生产蛋白。命名为 pLysS 和 pLysE 的宿主菌带有编码 T7 溶菌酶(为 T7 RNA 聚合酶的天然抑制物)的 pET 相容性质粒。带有 pLysS 的细胞












