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文献和实验The OP9-DL1 System: Generation of T-Lymphocytes from Embryonic or Hematopoietic Stem Cells In Vitro
al. 2006b ). MATERIALS Reagents Anti-CD24 monoclonal antibody (mAb) (J11d clone) (for Protocol 3) Use either culture supernatant that contains anti-CD24 mAb or purified anti-CD24 mAb (see Step 55). BDPharmLyse (red blood cell lysing
(常为IgG)组分。常用的纯化IgG的方法为饱和硫酸胺盐析和层析法。蛋白质在不同的盐浓度的溶液中,其溶解度不一样,盐离子干扰蛋白质和水分子间氢键形成,因为水—盐结合比水—蛋白质结合更稳定,蛋白质即可从溶液中沉淀出来。蛋白质分子越大,沉淀时所需盐离子浓度越低。免疫球蛋白(Mr1.5×105)比血清中主要蛋白质白蛋白(Mr6.7×104)的分子大得多,抗体在30%—50%饱和度的硫酸盐中析出,而白蛋白需在70%—80%饱和度才析出,因此常用33%饱和度的硫酸胺纯化血清中的IgG.盐析时为了减少抗体
特宝生物公司);抗人TCR-γδ-FITC和抗人CD44-FITC均购自杭州联科生物(Immunotech, France);SEAC全自动酶免系列分析仪(北京希亚克技术有限公司);流式细胞仪(美国B.D公司的FACSCaliar),分析软件为CellQuest,每个标本分析细胞数≥1×104。1.2 方法1.2.1 γδT细胞的培养和鉴定 取健康献血者末梢抗凝血10mL,加入淋巴细胞分离液上,以2000r/min离心15min,吸取单个核细胞层,用生理盐水洗涤三遍(1500r/min离心,10min/次),加入
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