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- 赛默飞（Thermo Fisher）
- 7TM0331D
- 2025年07月10日
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文献和实验alkaline lysis purification: 7a. Precipitate the DNA by adding 1 ml of 95% ethanol, and resuspend the dried DNA pellet in 100-200 ul 10:0.1 TE buffer. Electrophorese an aliquot of the DNA sample on a 0.7% agarose gel to crudely determine
小牛血清+0.1% 叠氮钠；建议使用时新鲜配制），制备成细胞悬浮液。2.取 25ul 细胞悬浮液滴加入微孔培养板或 FACS 试管。Staining Cocktail 制备3.制备 2X Staining Cocktail：FACS Buffer+ MHC 四聚体（建议稀释比例为 1:50～1:100）+ Anti-CD8/FITC 抗体或其他用作内参的抗体（请参考其说明书进行稀释）。染色孵育4.取 25ul 2X Staining Cocktail，滴加入步骤 2 中的微孔培养板或 FACS
该蛋白总的表达量(包括磷酸化和未磷酸化的该蛋白)，甚至还可跑另一个gel，压内标。但是本人不建议如此做，因为这样比较时误差还是较大的。因此，比较公认的，本人也建议如此的方法，即：将原先结合上的磷酸化抗体及二抗洗去(strip)，strip solution如下: 100mM 2-mercaptoethanol (stock 14.335M, 取697.6ul) 2% SDS (stock 10%, 取20ml) 62.5mM Tris (pH6.7)(stock
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