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文献和实验【精华】vol 687 Chapter 4 巢式PCR侧翼序列测定实验
in (see Note 13) 1× reaction bufferincluding 300 uM dNTPs, 3.75 U PfuTurbo® DNA Polymerase, 100 nM GSPT12G3, and 250 nM GSP1 andGSP4. Thermocycling parameters used are: 40 cycles of 94°Cfor 1 min, 55°C for 1 min, 72°C for 2 min (see Note 7). 6. Product
液(1:3稀释好)再次旋涡混匀, 避光4℃孵育30分钟到60分钟。 5、将破膜缓冲液(#00-8333)用去离子水1:9稀释,制成工作液(每个样本的用量为4~5ml)。 6、无需洗涤,直接加入2ml破膜缓冲液工作液(1:9稀释好)300-400g离心洗涤细胞并弃去上清液(可选)重复洗涤一次。 7、加入100 ul流式染色缓冲液重悬细胞体系中加入2 ul 胞内抗体来源的血清,室温避光孵育30分钟。 8、体系加入适量的核内(及胞浆)抗原抗体,对照管加入等量的同型对照,按说明书条件孵育。
【精华】vol 687 Chapter 5 PCR引物与PCR引物设计
, the primer Tm default value of (60°C) wasincreased to 70°C to obtain a primer of approximately 30nucleotides (see Note 6). 3. Select “Design Primers” and iCODEHOP and then use theBLOCKMAKER program to identify sequence blocks conservedwithin the input
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