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文献和实验Native Chromatin Preparation and Illumina/Solexa Library Construction
19, CD36, CD56, CD123, and glycophorin A. 9. Mix well and incubate for 10 min at 4°C-8°C or on ice. 10. Add 30 µL of T cell isolation buffer per 107 cells. 11. Add 20 µL of anti-biotin microbeads (from T
Intracellular Cytokine Staining Protocol
28 (2ug/ml soluble) 5hrMonensinJES5-16E3IL-12mouse PECmIFNg (100ng/ml) (2hr)/LPS (100ng/ml) (22hr)2hr/22hr-MonensinC17.8GM-CSFmouse spleenConA (3ug/ml) (2d)/IL-2 (20ng/ml)+IL-4 (20ng/ml) (3d)2d/3danti-CD3 (10ug/ml immobilized)+anti-CD28 (2ug/ml soluble
汇合度达到 70~80%。感染非分裂细胞如神经元细胞,接种后不再增殖,可按照 100% 的汇合度进行接种。 3、慢病毒感染原代细胞效率较低,若需要构建稳转株使用慢病毒感染,为提高感染效率可使用助转剂 polybrene,但部分细胞对 polybrene 比较敏感,可以用 1-10ug/mL 的范围筛选合适的浓度,以 24h 内细胞无明显毒性反应为佳。也有部分细胞不可添加,需要提前查阅文献资料确认,以免影响后续实验。 图 2:腺病毒感染海马神经元原代细胞 三、原代 T 细胞 原代T细胞较「娇嫩」,针
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