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- 赛默飞（Thermo Fisher）
- 11-9211-80
- 2025年07月14日
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25UG
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文献和实验Mouse anti-Human CD25 mAb,Biotin 50T/100T 800/1200 L0074 Mouse anti-Human CD25 mAb,Biotin 100ug/500ug 800/2500 L0075 Mouse anti-Human CD29 mAb,FITC
5ml装入反应瓶中，加入pH9.0 0.5mol/L碳酸盐缓冲液4ml；25℃磁力搅拌下，逐滴加入1ml含2mg的FITC溶液，25℃下搅拌1h，4℃下继续搅拌4h，然后进行纯化、鉴定。二、荧光抗体的纯化1、除去未结合荧光素：（1）透析法：将标记后的抗体溶液装于透析袋，于流动的自来水中透析约10min，然后移入pH=7.4的磷酸盐缓冲液中，在4℃下透析，直至透析外液在紫外灯下不呈现荧光为止。（2）凝胶过滤法：葡聚糖凝胶G25或G50，用pH7.4的0.01%PBS溶胀后装柱，加入标记后的抗体溶液
ml DMSO中，待溶解后立即缓慢滴加于抗体液内，边加边轻搅；其后室温避光作用2小时。 （4）将交联物经Sephadex G25或G50柱层析除去游离的荧光素；分管收集第一峰为标记的抗体。 （5）FITC的结合物质量鉴定 IgG量（mg/ml）=（OD280-OD495×0.35）/1.4 F/P=2.87×OD495/（OD280-OD495×0.35），一般说，FITC对抗体的摩尔比为3：1时适合于组织切片染色，为5-6：1时适合于细胞悬液染色。以标记抗体染色各种抗原，测定其特异性染色滴度和非
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