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文献和实验. Cell Sorting (Lin-,cKit+,Sca1+): 1. Incubate cells in FcgRII block on ice for 10 min. 2. Stain an aliquot and with PE-IgG2a and FITC-IgG2b isotype antibodies as neg. controls. Incubate remainder of cells with Sca-1 PE, plus c-kit FITC antibodies
2.5μg/μl包板;加50μl克隆细胞上清液,再加辣根过氧化物酶标记兔抗鼠IgG(1:1000稀释),于酶标仪490nm处读取吸光度值。 1.2 Hp-mAb特性鉴定 抗体类别及亚类鉴定无血清杂交瘤 细胞培养 上清液与抗小鼠各类免疫球蛋白及其亚类IgA,IgM,IgG1,IgG2,IgG3,IgG2a,IgG2b(Miles LabInc,USA)作免疫双扩散试验。①聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE):Hp109,Hp152,H99
2.5μg/μl包板;加50μl克隆细胞上清液,再加辣根过氧化物酶标记兔抗鼠IgG(1:1000稀释),于酶标仪490nm处读取吸光度值。 1.2 Hp-mAb特性鉴定 抗体类别及亚类鉴定无血清杂交瘤 细胞培养 上清液与抗小鼠各类免疫球蛋白及其亚类IgA,IgM,IgG1,IgG2,IgG3,IgG2a,IgG2b(Miles LabInc,USA)作免疫双扩散试验。①聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE):Hp109,Hp152,H99
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