- ￥200
- 烜雅生物
- XY-ZL0317
- 国产
- 2026年02月25日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
180
- 英文名：
pFastBac1
- 保质期：
２年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
质粒干粉
别称：DB00079;pFastBacI
基因长：
质粒宿主：昆虫细胞
质粒用途：蛋白表达
片段类型：ORF
片段物种：空载体
原核抗性：Amp,Gen
筛选标记：
荧光标记：
启动子：PH
复制子：pUC
感受态：DH5a
温度：37度
正向引物：pFastbac-F：TATTCCGGATTATTCATACC
反向引物：pFastBac-R：CCTCTACAAATGTGGTATGG
注意事项：本产品仅供科研使用，不能用于临床试验，包括人体口服、注射或者体外用药。
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文献和实验【专题讨论】杆状病毒——昆虫细胞蛋白表达系统，影响蛋白表达的因素？
不知道有多少人成功用杆状病毒——昆虫细胞表达系统成功进行过蛋白表达？我最近表达一段病毒的非结构蛋白nsp-6，构建的重组Bacmid质粒经PCR鉴定正确，可是进行表达时，却未见蛋白表达，同时进行的试剂盒对照（含CAT基因的重组细胞中则有较好的表达。 我听说约有70%的蛋白在原核表达系统中是不表达的，但不知道这样的情况会不会发生在我用的昆虫细胞表达系统，除了实验操作失误方面的原因，还有什么因素是不使蛋白表达的，请大家讨论一下。 下面是我的实验过程，请高手指教，同时希望也给新手一个指导
粗心人。这样的错误会给将来的克隆造成麻烦。b)如果打算PCR后直接酶切，不要忘了在酶切位点的外侧再加上保护碱基，不同的酶对于保护碱基的要求是不同的。如果不设计保护碱基，则多半要用TA克隆的方式连接到质粒上，这时要注意Taq 酶的选择。若想在目的序列上附加上并不存在的序列，如限制位点和启动子序列，可以加入到引物5'端而不影响特异性。当计算引物Tm值时并不包括这些序列，但是应该对其进行互补性和内部二级结构的检测。十、有时候，对于引物设计仅了解有限的序列信息。比如，如果仅知道氨基酸序列，可以设计兼并
预先灭菌好的10cm2平皿铺板，培养基层2－3mm，待冷却凝固后，密封倒置于4℃保存备用。 碱裂解法提取质粒所用液体 1)溶液I: 溶菌酶 4mg 去离子水 1.4ml 500mM葡萄糖 0.2ml 100mMEDTA 0.2ml 250mMTris-HCl (pH=8.0) 0.2ml 2)溶液II: 去离子水 2.4ml 10%SDS 0.3ml 2MNaOH 0.3ml 3)溶液III: 乙酸钾 29.25
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