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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
10
- 英文名:
pCAGGS-FLAG-N
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
质粒干粉
别称:DB00094;
基因长:
质粒宿主:哺乳细胞
质粒用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:空载体
原核抗性:Amp
筛选标记:
荧光标记:
启动子:CAG
复制子:pUC
感受态:DH5a
温度:37度
正向引物:pcaggs-F:GTTCGGCTTCTGGCGTGT
反向引物:pcaggs-R:TATGTCCTTCCGAGTGAGAG
注意事项:本产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药。
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文献和实验可考虑翻转半小时;样品preclear用protein A beads翻转半小时。实际经验,杂蛋白若是很黏怎么处理都只是相对好一些。所以,IP、漂洗的盐浓度影响更大。 coIP: 抗体剂量上文提过了;其他flag、protein A等等beads一般用10ul足够了,偶尔根据需要微调,诸如过表达纯化蛋白。总之,一般CE的成本较低,若用CE饱和抗体、beads,只要你抗体、beads和操作始终一致,最后IP的A蛋白能保证一致,结果有效。 干粉状的beads用IP buffer充分
.6*lg[K+]+0.41(%[G+C])-(675/n)。以上两种算法都是基于碱基组成而不是碱基排列而计算的,事实上相同碱基组成的引物Tm 可能差异不小:GGGAA 和GAGAG 的Tm 是不一样的,所以确定引物Tm 最可信的方法是近邻分析法。这种方法从序列一级结构和相邻碱基的特性预测引物的杂交稳定性。大部分计算机程序如Primer5 等均使用近邻分析法。九、当在引物5’端添加酶切位点时要考虑:a)该目的序列内部不得含有相同的酶切位点,在引物发出后才发现错误的事情本人就干过,在论坛上也能看到这样的
义翘神州日前曾邀请杨嘉慧博士进行了一场题为「获得高品质重组蛋白实验方案以及经典案例分析」技术公开课,课后收到了很多专业的提问,现将相关的问答简单列举一些,希望能够帮助更多的人获得高质量的重组蛋白。1. 是不是质粒片段越大转染效率越低?解答:一般情况是这样的,质粒片段越大,转染效率越低,但这也与表达宿主有关,不能一概而论。所以有时在进行表达载体优化时,会将质粒的片段或非重要功能区的一些片段进行删减,可以获得较好的转染效率。2.HEK293 瞬转表达重组蛋白相对于 CHO,哪个更有优势?解答
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