1,5-二苯基-1H-吡唑-3-甲醛 1,5-Diphen
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
1,5-Diphenyl-1H-pyrazole-3-carbaldehyde
- 库存：
999
- 供应商：
智溯科ZSK
- CAS号：
112009-28-6
- 规格：
10mg///100mg///200mg
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文献和实验细胞或悬浮细胞用 0.1Mol/L PBS 液冲洗，离心沉淀后，立即转入固定液 (2% 甲醛液或 2% 戊二醛液均可 )pH 7.2 ， 4 ℃ 固定 5min ～ 30min( 依抗原性质所定 ) 。如病料为组织块，则取适当大小，先固定 1h 然后取出，以新的双面刀片切成 50 ～ 100 µm 的薄组织再行固定 1h ～ 2h 。 3 ．漂洗 以 PBS 液漂洗过夜，换液 3 ～ 4 次。 4 ．血清孵育， 25 ℃ 1h
【操作】 1．RNA的提取见前。 2．变性胶的制备：取琼脂糖0.2g，加入 DEPC H2O 12.4ml，加热熔化，冷却至60℃时加入5×甲醛凝胶电泳缓冲溶液4.0 、37%甲醛3.6ml、混匀、制胶。待胶凝固后，置于1×甲醛凝胶电泳缓冲溶液中预电泳5min。 3．样品制备 取总RNA4.5 ，加入5×甲醛凝胶电泳缓冲溶液4.0 、37%甲醛3.6 、甲酰胺10、于65℃温浴15分钟,水浴冷却。加入上样
保温30min。 （5）4%多聚甲醛PBS 5min。 （6）PBS冲洗2×min。 （7）0.25%乙酸酐（0.1mol/L三乙醇胺配）10min。 （8）2×SSC冲洗10min。 （9）将切片用灭菌吸水纸吸干，然后入杂交液。核酸探针浓度为0.25～0.5μg./ml。每一正常成年大鼠脑冠状切片15μl杂交液足够。43℃保温12～16h。 （10）4×SSc 37℃冲洗30min。 （11）2×SSC（含RNasea 20
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