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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Methyl3-amino-4-(aminomethyl)benzoate
- 库存:
999
- 供应商:
智溯科ZSK
- CAS号:
1618083-32-1
- 规格:
10mg///100mg///200mg
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文献和实验清楚,因此其需要后续进一步分析确定,此外,RLGS图谱不能完全确认所缺失的片段是由于甲基化所致还是由于DNA本身缺失所致[5]且结果分析复杂,不易解释。 2.3.2 MBD(Methyl-CpG binding domain column chromatography,甲基化结合区)柱层析法 根据MBD蛋白家族和MeCP2的特性,Masahiko Shiraishi等2004年[50]提出了一种新的方法MBD柱层析法,用于筛选和发现基因组中甲基化的情况。并且比较了MBD和重亚硫酸盐基因组测序法,得出:用MBD
化位点明确,实验结果易解释;缺点是:1.由于CG不仅仅限于CCGG序列中,因此非该序列中的CG将被忽略;2.只有检测与转录相关的关键性位点的甲基化状态时,该检测方法的结果才有意义;3.相对而言,Southern方法较复杂,且需要样本的量大;4.存在着酶不完全消化引起的假阳性的问题;5.不适用于混合样本。 2.2.2 直接测序法 直接测序是由Frommer等[25]提出的研究DNA甲基化方法。过程是:重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变(见图
甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变(见图1),行PCR扩增所需片段,则尿嘧啶全部转化成胸腺嘧啶,最后,对PCR产物进行测序 并且与未经处理的序列比较,判断是否CpG位点发生甲基化。此方法是一种可靠性及精确度很高的方法,能明确目的片段中每一个CpG位点的甲基化状态,但需要大量的测序 ,过程较为繁琐、昂贵[27]。 图1:重亚硫酸盐处理过程示意图。DNA 经重亚硫酸盐处理后,甲基化的胞嘧啶不变,未甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶2.2.3 甲基化特异性的PCR
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