2-氨基(甲基)苯胺基-1-乙醇,2-2-Amino(met

转甲基酶

转甲基酶 transmethylase ， methyl trans-ferase 亦称为甲基转移酶，已知有各种不同的转甲基酶，以 S- 腺苷蛋氨酸、甜莱碱（ betain ）和二甲基噻亭（ dimethylthetin ）作为甲基的供体，把氨基、羟基、硫氢基（ thiol ）甲基化。结合在四氢叶酸上的活性 C 1 单位的还原而生成甲基，通过 5- 甲基四氢叶酸转甲基酶与同型半胱氨酸（ homocysteine ）被甲基化而生成蛋氨酸。这种酶是以钴胺酰胺（ cobami

DNA甲基化研究方法的回顾与评价

化位点明确,实验结果易解释；缺点是：1.由于CG不仅仅限于CCGG序列中，因此非该序列中的CG将被忽略；2.只有检测与转录相关的关键性位点的甲基化状态时,该检测方法的结果才有意义；3.相对而言，Southern方法较复杂，且需要样本的量大；4.存在着酶不完全消化引起的假阳性的问题；5.不适用于混合样本。 2.2.2 直接测序法 直接测序是由Frommer等[25]提出的研究DNA甲基化方法。过程是：重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变（见图

DNA甲基化研究方法的回顾与评价(图)

甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变（见图1），行PCR扩增所需片段,则尿嘧啶全部转化成胸腺嘧啶，最后,对PCR产物进行测序 并且与未经处理的序列比较,判断是否CpG位点发生甲基化。此方法是一种可靠性及精确度很高的方法，能明确目的片段中每一个CpG位点的甲基化状态，但需要大量的测序 ,过程较为繁琐、昂贵[27]。 图1：重亚硫酸盐处理过程示意图。DNA 经重亚硫酸盐处理后，甲基化的胞嘧啶不变，未甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶2.2.3 甲基化特异性的PCR