Cy5荧光素标记试剂盒

产品概述：

EnkiLife Cyanine5标记试剂盒包含标记抗体蛋白的多个组分，如高性能的荧光素衍生物，纯化用超滤离心管，洗脱标记缓冲液等，可轻松可靠地标记抗体、蛋白质和其他分子，以便用作荧光探针。

本试剂盒优势：

快速：标记时间仅需约30 分钟，同时兼顾标记效果和标记效率。

简便：每只染料试剂已经优化设计好对应的抗体量，无需繁琐计算，固体染料形式批次稳定，按照步骤进行操作可得到较好效果。

灵活：大规格的试剂盒中提供的染料进行了分装，批次性能一致，方便多次标记使用。

标记效果突出：优化了的标记缓冲液，染料标记位点相对固定，增强了标记后抗体的同质性。

胺特异性标记：Cyanine5能高效地在伯胺上对抗体和其他纯化蛋白质进行标记。

标记蛋白：本标记试剂盒主要针对标记IgG抗体，和IgG抗体具有大小及性质类似的蛋白也可以标记，但是标记其他大小其他种类的蛋白需要更换耗材。

 

染料简介：

Cyanine5染料是一种明亮的，红色荧光的染料，配合633 nm或647 nm激光系一起使用。此长波长染料相对于其他荧光团的重要优势是在该光谱范围中生物样品的自发背景荧光低，且在这个区域CCD相机/检测器检测灵敏度最高。另外，CY5荧光染料的光漂白速率低于FITC等短波长染料，适配多数荧光检测设备(如Cy5通道滤光片），具备多平台兼容性。

 

Cyanine5染料的性质：

染料别称：Cy5，sulfo-Cy5

激发光源：633 nm/647nm

激发波长：647nm

发射波长：665nm

摩尔消光系数(L/(mol*cm))：271000

纯度：> 95%

溶解性：在DMSO、DMF中溶解度较高

 

试剂盒规格

产品组分	不同规格组分含量			储存温度
	40μg抗体	200μg抗体	2mg抗体
Cyanine5	1管	5管	5管	开封后-20℃避光保存
50 KDa超滤管*	1 set**	1 set**	1 set**	RT
标记缓冲液S	10 mL	10 mL	10 mL	2~8℃
1×PBS (pH 7.4)	10 mL	10 mL	10 mL	2~8℃
DMF	100 μL	100 μL	100 μL	2~8℃, shading light
标记蛋白保存液	1mL	1mL	5mL	2~8℃
建议标记抗体量	每管标记20~40μg，最佳标记20μg	每管标记20~40μg，最佳标记20μg	每管标记100~400μg，最佳标记200μg

 

Cyanine5染料应用：

标记抗体作为免疫荧光探针使用

标记一抗作为流式细胞术应用

标记DNA/RNA探针进行荧光原位杂交（FISH）

标记蛋白在差异凝胶电泳（DIGE）中使用（蛋白芯片）

标记纳米颗粒或抗体，用于实时监测活体组织内靶标分布（活体与小动物成像）

标记PD-L1抗体示踪肿瘤免疫微环境变化

和Cy3配对进行荧光共振能量转移（FRET)对蛋白质-蛋白质/DNA-蛋白相互作用验证

Cyanine5标记二抗替代传统化学发光法，直接定量目标条带荧光强度，实现高敏Western Blotting的低丰度蛋白检测

和PE染料结合形成串联染料，构建新型荧光染料（FRET原理）

Cyanine5标记微球偶联捕获抗体，通过流式检测区分目标分子，实现多指标联检（液相芯片，多因子检测）

 

标记原理

在一定pH范围内，荧光染料活化基团专一性与抗体蛋白上的伯氨基反应，形成稳定的酰胺键，从而实现与抗体蛋白的偶联。