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原代平滑肌细胞培养体系

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  • MeisenCTCC
  • CTCC-004-PriMed
  • 2026年04月20日
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      500ml

    产品规格:500ml
    产品介绍
    原代平滑肌细胞培养体系是一个为体外生长的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳动物的平滑肌细胞设计的理想的完全培养基方案。本体系是一个基于碳酸氢盐的缓冲体系,可以在孵育的 5%的 CO2的气体环境下维持一个围绕 pH7.2 的酸碱缓冲体系。本体系是一个无菌的液体混合系统,中包含必须和非必须氨基酸、维生素、激素、生长因子、微量元素和一些其他的有机和无机化合物以及胎牛血清(10%)。本培养体系是基于固定配方配制的液态培养体系,可以为体外培养的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳动物的平滑肌细胞提供一个确定适宜的平衡营养环境,并且可以选择性的促进平滑肌细胞的扩增。向较于低血清培养体系,本体系可以较大程度提高平滑肌的增值速度,但是细胞传代次数则相对较少。
     
    体系组成
    名称 体积 浓度 保存条件
    原代平滑肌细胞基础培养基
    500ml
    4℃、避光
    原代平滑肌细胞培养添加剂
    5ml
    100×
    -20℃、避光
    胎牛血清(FBS)
    50ml
    终浓度 10%
    -20℃、避光
    双抗(青霉素/链霉素,P/S)
    5ml
    100×
    -20℃、避光
     
    运输和保存
    放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输(体系中的各组分请按上述列表中的
    条件进行储存)
     
    产品使用
    1. 本产品仅能用于科研
    2. 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
    3. 本产品未通过用于活体诊断的审核
     

    注意事项

    本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

    拆包 & 存储

    1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液 

    2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出,并按照说明书操作步骤进行培养传代 

    注意:如为冻存管,请收到后立即解冻培养

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      实验步骤(一)、取SD 大鼠一只,实验时断椎处死。(二)、在无菌条件下快速自肛门上2 cm 取结肠10 cm 左右,生理盐水中反复灌肠冲洗。(三)、移入含300 U/ml青霉素、300 U/ml 链霉素的HepesRinger缓冲液中浸泡,肠段内外各15 min。(四)、将经抗生素浸泡过的肠段移入含Hepes Ringer缓冲液的塑料培养板中(培养板预先铺上705胶),在体视显微镜下沿肠系膜对侧纵行切开肠段,皮内针固定好四角,仔细地刮除粘膜层,翻转至外侧,小心地撕去肠系膜,再仔细地刮去浆膜

    • 膀胱平滑肌细胞原代培养

      、不要加入DMEM为主要成分的培养液(否则胰蛋白酶失活)12、转移入培养瓶中13、4度下过夜孵育。14、加0.25%胰蛋白酶,36.5度振荡消化15~30min,弃上清。15、200目(74um)不锈钢网过滤。(可省),转移入离心管,***吹打后待可见物沉淀,吸尽沉淀(避免组织块培养法)16、离心1000转/min,10分钟 离心半径13cm?弃上清18、加培养液至10ml(ok)17、转移入培养瓶中19、CO2恒温箱中培养20、12h后收集未贴壁细胞并计数

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      较简单;但容易产生杂质如成纤维细胞等,成纤维细胞生长快,故培养之细胞质量较差;培养的大多数细胞无收缩性;且原代细胞的获得需3~4周,获得大量平滑肌细胞耗时长(17)。既往酶消化法较组织块法复杂、精细;适宜的酶浓度和培养时间的确定较为困难;然而在较短时间内可获得大量的平滑肌细胞,1996年有学者报道(Chambers(18)等)酶消化法纯度为70%。可见一种快速、高效、高纯度的酶消化法培养膀胱平滑肌的方法显得尤为重要。 本实验研究两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24小时均可见膀胱平滑肌细胞

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