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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Agrobacterium GV3101 Chemically Competent Cell
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
冻存管
英文名称:Agrobacterium GV3101 Chemically Competent Cell
培养基:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,氯化钠:10.0,琼脂:15.0,pH:7.0±0.2(25℃)
生长条件:28℃;18-24h;好氧;
存储条件:-80℃
安全等级:1
操作步骤:
1.取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100μl感受态加1ug(体积不大于10ul)质粒DNA,用手拨打管底混匀,依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、28℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3.加入700μl无抗生素的LB液体培养基,于28℃振荡培养2~3小时。
4.6000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天(当平板只含有50ug/ml kan 时,28℃培养48h即可;平板中同时加入50ug/ml kan,20ug/ml rif 时,需28℃培养60h;如果使用的平板含有50ug/ml rif 则需要28℃培养72-90h)。
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文献和实验Agrobacterium growth and transformation (农杆菌培养及转化)
Growth and storage of Agrobacterium tumefaciens(农杆菌培养及转化) Strain GV3101: resistant to gentamycin and rifampicin so add 25-50 ug/ml Gentamycin, 10 ug/ ml rifampicin on plates or in liquid media for selection. GV3101
1. 50 ml 离心管 2. 光谱仪 3. 紫外灯 4. 荧光显微镜 四、步骤 1. 挑取单克隆于5 ml LB液体培养中,28~30°C震荡培养。通常,LB中加入100 ug/ml 庆大霉素(农杆菌株GV3101携带抗性),50 ug/ml 大观霉素(载体携带)。 2. 将1 ml 过夜培养的农杆菌转接到25 ml LB液体培养基中(加有与1相同的抗生素,另外加入高压灭菌的乙酰丁香酮)。 3. 检测过夜培养的菌液OD600的值。 4. 5000 g,15
或宿主菌 请问pucm-t载体能否用JM109转化? 转化后问题 请教一个关于转化后筛选的问题 求助!鉴定转化产物 感受态细胞 请教各位化学转化的感受态细胞 [/如何制作转化效率高的BJ5183化学感受态 HANAHAN法制备高频转化的感受态细胞是不是非常脆弱啊? 讨论细菌转化时热休克的作用(结果update) 转化过程中的外源DNA吸收机制 转化效率 怎样计算转化效率? 求教转化效率如何计算? 请教-这是否是转化率的问题
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