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- 上海
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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999
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6个月
- 保存条件：
2-8°
- 规格：
50T
Raillietina spp.瑞氏绦虫染料法荧光定量PCR试剂盒
PCR 试剂盒是一种用于进行 PCR 实验的成套试剂，以下是其具体介绍：
组成成分：
DNA 聚合酶：是 PCR 反应中关键的酶，负责催化 DNA 链的合成。常见的有 Taq 聚合酶，具有耐高温的特性，能在高温条件下保持活性，此外还有各种改良型的高保真聚合酶，可提高 DNA 复制的准确性。
dNTPs：包含 dATP、dCTP、dGTP、dTTP 四种脱氧核苷酸，为新合成 DNA 链提供原料。
反应缓冲液：含有维持 PCR 反应所需 pH 值和离子浓度的组分，还可能包含增效剂或稳定剂，以保证反应在适宜的环境中进行。
引物：特定的短片段单链 DNA，长度通常在 20 - 30bp 之间，能够与目标 DNA 序列的两端互补结合，作为 DNA 合成的起点，决定了 PCR 扩增的特异性。
探针（可选）：在实时定量 PCR（qPCR）等检测中会使用，标记有荧光染料或荧光共振能量转移（FRET）对，可用于检测特定 DNA 序列的扩增，实现对目标 DNA 的定量分析。
类型：
常规试剂盒：适用于一般目的的 DNA 扩增，如基因片段的克隆、基因分型等，不涉及定量分析，主要通过凝胶电泳等方法对扩增产物进行定性检测。
qPCR 试剂盒：包含特殊的荧光探针或染料，如 SYBR Green 染料或 TaqMan 探针等，用于实时监测 PCR 过程中的 DNA 扩增量，可精确测定起始模板的量，广泛应用于基因表达分析、病原体载量监测等领域。
多重试剂盒：允许在同一反应体系中同时扩增多个不同的 DNA 目标序列，可节省时间和试剂，提高检测效率，常用于多种病原体检测或多个基因位点的同时分析。
反转录 PCR（RT - PCR）试剂盒：除了包含常规 PCR 所需的成分外，还含有将 RNA 转录成 cDNA 的逆转录酶，用于从 RNA 模板开始的 PCR 扩增，可用于检测细胞或组织中的 RNA 表达水平，如 mRNA 的定量分析、病毒 RNA 的检测等。
应用领域：
病原体检测：快速识别细菌、病毒等微生物的存在，如新冠病毒、流感病毒、结he杆菌等的检测，有助于传染病的早期诊断和防控。
遗传病筛查：检测特定基因突变或多态性与疾病的关系，如镰状细胞贫血症、囊性纤维化等遗传性疾病的基因检测，为疾病的诊断、遗传咨询和产前诊断提供依据。
基因表达分析：定量分析特定基因在不同组织、不同发育阶段或不同生理病理条件下的表达水平变化，研究基因的功能和调控机制。
遗传指纹分析：通过扩增特定的 DNA 片段，分析其多态性，用于个体识别、亲子鉴定、法医物证鉴定等领域。
环境监测：检测土壤、水等环境样本中的微生物多样性，了解环境中的微生物群落结构和功能，监测环境污染物对微生物的影响等。
选择要点：选择合适的 PCR 试剂盒需要考虑目标序列的长度和复杂性、PCR 反应的类型（如常规 PCR、qPCR、多重 PCR）、预期的扩增效率和特异性、实验预算和样本数量等因素。同时，还需关注试剂盒的品牌、质量、用户评价以及是否有相关的技术支持等。
上海笃玛生物科技有限公司
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文献和实验，不靠壁，不贴液面。 混匀平均分装的注意事项： 1、第一管吸液前需要先把枪头在液面中浸润一下，以保证三复孔的枪头吸液量是差不多的。 2、用混匀器进行混匀，不要用移液器吹打。 详细说明书 transhold cat. A2010A0112荧光定量PCR Premix试剂盒(荧光染料) （FQ
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡，校正加样误差或者是孔与孔之间的误差，提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系，也可以不加ROXTM染料校正。通常来讲，real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80-150bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法，最好在PCR扩增程序结束
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