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现货
- 英文名:
Hot Start Taq DNA Polymerase Specification(Antibody modification)
- 保质期:
2年
- 供应商:
湖北魏氏化学试剂
- 保存条件:
遮光干燥密封阴凉处储存
- 规格:
1瓶
热启动Taq DNA聚合酶(抗体修饰)
中文:热启动Taq DNA聚合酶(抗体修饰)
英文:Hot Start Taq DNA Polymerase Specification(Antibody modification)
纯度:≥90%
中文同义词:HOT TAQ酶; HOT TAQ DNA聚合酶;热启动TAQ DNA聚合酶(抗体修饰)
英文同义词:Hot Taq DNA; Hot Taq DNA Polymerase,
产品概述:
Taq DNA 聚合酶是一种耐热的 DNA 聚合酶,来源于水生栖热菌(Thermus aquaticusYT-1),该酶具有 5’→3’ 的聚合酶活性和双链特异性 5’→3’ 的核酸外切酶活性。该酶使用抗体修饰封闭了低温以及室温的酶活。经过 95℃ 热激活后,抗体脱落释放酶活。从扩增体系配制到 PCR 扩增前,不会产生由于引物错误配对而形成的非特异性扩增,最大程 度降低非特异扩增和引物二聚体的形成,提高扩增的灵敏度和特异性。
运输与保存方法: ≤0℃ 运输;-25~-15℃ 保存。
单位定义: 用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物,74℃,30 min 内,摄入 10 nmol 的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位 (U)
质量控制
• 核酸内切酶残留检测:20 U 的本酶和 4μgpUC19 DNA 在 37℃ 下孵育 4 h,DNA 的电泳谱带不发生变化。
• 5 kbλDNA 扩增检测:PCR 体系中加入 1.25U 本酶,200μM dNTP,以 5 ngλDNA 为模板扩增 25 个循环后,琼脂糖凝胶电泳,可见有单一的特异性 5 kb 条带。
• 核酸外切酶检测:50μL 反应体系体系中加入 12.5 U 本酶,1μM 5’-FAM 标记的寡核苷酸,37℃ 孵育30 min 无降解信号。
• RNase残留检测:20 U 的本酶和 1μg RNA 在 37℃ 下孵育 2 h,RNA 电泳谱带不发生变化。
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文献和实验对于 Taq 酶扩增性能更强。 1. 选择热启动酶降低非特异性扩增 在使用 Taq 酶进行扩增时,有时会出现非特异性扩增,可能的原因可以从模板、引物、体系、程序中一一排查。如模板是否被污染,引物特异性如何,Mg2+浓度偏高等等,其中一个不可忽视的原因是 DNA 聚合酶的种类是否合适。如果排查了其它原因仍旧有非特异性产物,可以选择热启动酶重新实验,即可有效减少或消除体系中其它产物的积累。常用的热启动酶分为两类:一类是化学法修饰的热启动酶,如 Ace Taq ,预变性 95℃5 - 10 min 即可
Taq DNA聚合酶是从一种水生栖热菌(Thermusaquaticus)yT1株分离提取的.yT是 一种嗜热真菌,能在70~75℃生长.该菌是1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉 中分离的. (一)酶活性与热稳定性 该酶基因全长2496个碱基,编码832个氨基酸,酶蛋白分子为 94KDa.其比活性为200000单位/mg.75~80℃时每个酶分子每秒钟可延伸约150个核苷 酸,70℃延伸率大于60个核苷酸/秒,55℃时
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