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- 上海
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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999
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6个月
- 保存条件：
2-8°
- 规格：
50T
Bunyamwera Virus布尼亚维拉病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
PCR 试剂盒是一种用于进行 PCR 实验的成套试剂，以下是其具体介绍：
组成成分：
DNA 聚合酶：是 PCR 反应中关键的酶，负责催化 DNA 链的合成。常见的有 Taq 聚合酶，具有耐高温的特性，能在高温条件下保持活性，此外还有各种改良型的高保真聚合酶，可提高 DNA 复制的准确性。
dNTPs：包含 dATP、dCTP、dGTP、dTTP 四种脱氧核苷酸，为新合成 DNA 链提供原料。
反应缓冲液：含有维持 PCR 反应所需 pH 值和离子浓度的组分，还可能包含增效剂或稳定剂，以保证反应在适宜的环境中进行。
引物：特定的短片段单链 DNA，长度通常在 20 - 30bp 之间，能够与目标 DNA 序列的两端互补结合，作为 DNA 合成的起点，决定了 PCR 扩增的特异性。
探针（可选）：在实时定量 PCR（qPCR）等检测中会使用，标记有荧光染料或荧光共振能量转移（FRET）对，可用于检测特定 DNA 序列的扩增，实现对目标 DNA 的定量分析。
类型：
常规试剂盒：适用于一般目的的 DNA 扩增，如基因片段的克隆、基因分型等，不涉及定量分析，主要通过凝胶电泳等方法对扩增产物进行定性检测。
qPCR 试剂盒：包含特殊的荧光探针或染料，如 SYBR Green 染料或 TaqMan 探针等，用于实时监测 PCR 过程中的 DNA 扩增量，可精确测定起始模板的量，广泛应用于基因表达分析、病原体载量监测等领域。
多重试剂盒：允许在同一反应体系中同时扩增多个不同的 DNA 目标序列，可节省时间和试剂，提高检测效率，常用于多种病原体检测或多个基因位点的同时分析。
反转录 PCR（RT - PCR）试剂盒：除了包含常规 PCR 所需的成分外，还含有将 RNA 转录成 cDNA 的逆转录酶，用于从 RNA 模板开始的 PCR 扩增，可用于检测细胞或组织中的 RNA 表达水平，如 mRNA 的定量分析、病毒 RNA 的检测等。
应用领域：
病原体检测：快速识别细菌、病毒等微生物的存在，如新冠病毒、流感病毒、结he杆菌等的检测，有助于传染病的早期诊断和防控。
遗传病筛查：检测特定基因突变或多态性与疾病的关系，如镰状细胞贫血症、囊性纤维化等遗传性疾病的基因检测，为疾病的诊断、遗传咨询和产前诊断提供依据。
基因表达分析：定量分析特定基因在不同组织、不同发育阶段或不同生理病理条件下的表达水平变化，研究基因的功能和调控机制。
遗传指纹分析：通过扩增特定的 DNA 片段，分析其多态性，用于个体识别、亲子鉴定、法医物证鉴定等领域。
环境监测：检测土壤、水等环境样本中的微生物多样性，了解环境中的微生物群落结构和功能，监测环境污染物对微生物的影响等。
选择要点：选择合适的 PCR 试剂盒需要考虑目标序列的长度和复杂性、PCR 反应的类型（如常规 PCR、qPCR、多重 PCR）、预期的扩增效率和特异性、实验预算和样本数量等因素。同时，还需关注试剂盒的品牌、质量、用户评价以及是否有相关的技术支持等。
上海笃玛生物科技有限公司
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文献和实验实时荧光定量 PCR 技术（Quantitative Real-time PCR，简称 qPCR）是在 PCR 扩增过程中，通过实时监测荧光信号的变化，达到对待检测样本中初始模板定量分析的方法。当前 qPCR 技术被广泛应用于临床疾病诊断，动物疾病监测，食品安全分析等领域。随着 2020 年新冠疫情在全球的蔓延，qPCR 技术更是因其检测通量高，速度快，操作简便等优势成为新冠病毒核酸检测的有效方法被众人所熟知。 那么为了得到可靠、准确的检测结果，我们需要注意哪些方面呢？其实决定一次实验成功
定量的方法。 实时荧光定量 PCR 是目前确定样品中 DNA(或 cDNA) 拷贝数最敏感、最准确的方法。如果用于 RNA 检测，这被称为逆转录实时 PCR 即（Real-time RT-PCR）是实时 PCR 法，它是指对 DNA 或经过反转录（RT-PCR）的 RNA 通过聚合酶链式反应并实时监测 DNA 的放大过程，在扩增的指数增长期就测量扩增产物，因为扩增指数增长期测量值与特异 DNA（RNA）起始量存在相关性，从而实现定量检测。 RealTime PCR 的基本目标是精确
或者 Ct 值偏大的样本孔，到底是真的没有要检测的对象，还是扩增有问题，亦或是提取中的问题？为了发现这种假阴性的发生，合理的阳性对照可以监控实验的不同步骤： 扩增对照 Amplification Control 可使用含有扩增片段的质粒、假病毒或者基因组 DNA/cDNA 作为扩增阳性对照，监控荧光定量 PCR 的体系是否正常，包括酶、引物、探针等。如果检测中包含多个目标片段，可以将这些目标片段都克隆到同一个质粒中，方便制备和使用。当扩增对照没有扩增，或者 Ct 值大于预期，则说明定量 PCR
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