Poly(A)加尾酶

Poly（A）＋RNA的分离纯化

值，以 1 ×装柱缓冲液作为空白对照。 9.      将包含大多数 OD260 物质的部分用 2.5 倍体积的乙醇沉淀。     从柱中洗脱 poly(A)+ RNA   10.  用 2 ～ 3 倍柱体积的无菌、无 RNA 酶的洗脱缓冲液从 oligo(dT)- 纤维素柱上洗脱 poly(A)+ RNA 。收集相当多于 1/2 ～ 1/3 柱体积的流出液。 11.  用石英杯或处理过的异丁烯杯测量各部分收集液在 260 mn 处的吸光

双荧光素酶报告基因测试

在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ，通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因（比如CAT，β-Gal，GUS）不够便利。因为各自的测试化学，处理要求，检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术，结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统，结合pRL载体系统，表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶，在单管中进行双荧光素酶报告基因测试，快速，灵敏，简便。系统还提供PLB裂解液，用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞，不需操作单个样品

RACE技术的原理和操作

-PCR技术的改进：改进之一是利用锁定引物（（lock docking primer）合成第一链cDNA，即在oligo（dT）引物的3' 端引入两个简并的核苷酸【5'-Oligo（dT）16-30MN-3'，M=A/G/C；N=A/G/C/T】，使引物定位在poly（A）尾的起始点，从而消除了在合成第一条cDNA链时oligo（dT）与poly（A）尾的任何部位的结合所带来的影响；改进之二是在5' 端加尾时，采用poly（C），而不是poly（A）；改进之三是采用RNase H-莫洛尼氏鼠白血。病毒