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50 T
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文献和实验可通过传递信息影响目标细胞的功能,激活细胞信号通路,在免疫、凝血、肿瘤等生理病理过程中发挥作用。外泌体可以作为临床诊断中的生物标志物或疾病治疗的靶点,同时也可以作为药物载体,参与神经疾病和癌症等多种疾病的病理过程。 三、关键步骤 — 外泌体分离 外泌体的分离纯度对外泌体的功能研究非常重要,但是外泌体的分离一直是困扰外泌体研究人员的一个难题。虽然分离外泌体方法有很多种,包括差速超速离心法(超离法)、超滤法、密度梯度离心法、免疫磁珠法、试剂盒法等。 但目前
一般公司多糖多酚植物RNA提取试剂盒失败原因和解决方案 很多植物RNA的样品由于含有大量的多糖、多酚、代谢产物、色素等成分,造成RNA提取过程中氧化、褐化、降解、由于植物品种的多样性造成情况更加复杂。手工的CTAB类的方法提取因为时间太长,太繁琐,手工方法不在讨论之列。一直以来没有一款好的试剂盒包括qiagen、promega等进口试剂盒也无法满足科研工作者对植物RNA提取的要求。 下面我们来分析一下植物RNA为什么不能提取成功的原因: 市面上最常见的RNA提取试剂盒
过滤孔,导致膜的寿命减短,分离效率较低。同时,外泌体会粘附在膜上,导致产量降低。 免疫磁珠法:用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合,即可将外泌体吸附并分离出来。该方法分离得到的外泌体的生物活性易受 pH 和盐浓度影响,不利于下游实验。 试剂盒分离法:目前商业化的外泌体提取试剂盒多种多样,提取效果良莠不齐。同时试剂盒本身的价格比较高,且外泌体的得率和纯度一般,不是性价比高的一种分离方法。此方法得到的外泌体对于后续的鉴定实验、细胞实验和动物实验等可能有影响。 五、如何鉴定外泌体
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