10×DNA凝胶加样缓冲液，红色（红、橙两种染料）

核酸电泳工作流程——5 大主要步骤

)，构象(例如超螺旋、开环或线性）以确保对迁移进行适当比较(了解更多: 结构和构象对样品迁移性的影响） 片段的数量和适当的分离形式，用于大小的估计 预期用途，如分子量标准是设计用于定性分析还是精确的定量测定 不同类型凝胶适用的分子量标准(例如，部分预制凝胶推荐设计特定分子量标准以获得最佳运行结果) 上样染料的性质，避免目的条带模糊(图 1) 上样缓冲液与使用凝胶的兼容性(例如，缓冲液的盐浓度会影响样品的迁移) 图 1. DNA 分子量标准差异。 分子量标准 #2 由色谱纯化的 DNA 片段组成，存在

手把手教你做好体外 DNA 重组

分子用限制性内切酶消化，通常按下列比例进行：双蒸馏水 适量10×内切酶缓冲液 1/10 体积DNA 1 μg限制性内切酶 1/10 体积 (DNA 用 1-10U)总体积 混匀后 37 ℃ 温育 30～120 min（二）DNA 酶切片段的琼脂糖凝胶电泳【实验原理】核酸在 pH 高于其等电点的溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。琼脂糖凝胶具有多孔的网状结构，以其为介质进行电泳时，不同大小的核酸可借凝胶的分子筛作用而得以分开。用溴化乙啶染色后，在紫外灯下，可见橘红色的核酸条带。琼脂糖凝胶常制成水平

PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶

酶。 图 1.非特异性扩增（左图）与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增（右图）。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液，您只需添加模板和引物，然后，开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤，使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样（注意：确保染料与下游应用兼容）。直接