S-vision免疫组化多聚二抗（山羊抗兔），即用型

[共享]应用SABC法进行免疫组化染色的体会

与其他免疫组化染色基本相似，有良好的可操作性。尽管SABC法操作简便，敏感性强，但是，在操作中仍然要遵循一定的原则，才能得到可信度高的结果。我所做的是《……》（题目略去，是2003年获国家自然科学基金专项基金项目，批准号：302400**）的动物实验部分。其中，需要利用抗β1-integrin观察深Ⅱ度烫伤大鼠局部在微电流治疗后β1-integrin的分布情况。应用的方法就是SABC法，试剂盒（即用型）来自博士德公司（不是为该公司做广告）。下面就按照实验步骤，谈一下我的一些体会。1、载玻片防脱片剂处理

IHC原理、操作及注意事项

两者之间，选择室温孵育有助于实验流程的便利，同时也适用于较多样本的检测。二抗一般室温孵育 30 min。 切片清洗(浸洗、冲洗和漂洗) 为了防止一抗、二抗等残留而引起非特异性染色，适当地加强清洗尤其重要，建议使用洗瓶冲洗 30 s X 3 次，而一抗孵育后可用 TBST 单独清洗。清洗中要注意单独冲洗，防止交叉反应造成污染，同时温和冲洗，防止脱片。TBS 的 pH 和离子浓度建议用为 7.6-8.0，浓度是 0.01 M。中性及弱碱性条件有利于免疫复合物的形成，而酸性条件则有利于分解；低

免疫组化经验总结

保护抗原和固定组织作用，过氧化氢孵育时间过长易引起脱片；现用现配，配好后4 ℃避光保存。不过，现在已有"第二代即用型免疫组化试剂盒"避免内源性生物素的干扰，推荐使用。   7）血清封闭 组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合，造成后续结果的假阳性；封闭血清一般是和二抗同一来源的，血清中动物自身的抗体，预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合；也可以用小牛血清、BSA、羊血清等，但不能与一抗来源一致。一般室温 10-30 min。但也要防止封闭过度 8）一抗和二抗