EDTA脱钙液（慢脱）

镍柱的清洗和保养

溶液对柱子进行清洗。（如果出现载量严重下降或者压力增加，需考虑彻底清洗） CIP（彻底清洗） 常规柱子（除了Ni excel）如出现反压严重升高或者柱子明显颜色改变，说明柱子需要进行彻底的清洗。 1. 脱镍： (1) 脱镍缓冲液：20mM 磷酸缓冲液，0.5M NaCl，50mM EDTA，pH 7.4。 (2) 使用5-10个柱体积的脱镍缓冲液冲洗柱子， (3) 然后再用5-10个柱体积的水冲洗柱子。 2. 去除沉淀蛋白、疏水性蛋白及脂蛋白：将柱子置换到1M NaOH中，室温1-2小时（若需

免疫组化中如何防止脱片

听到很多人抱怨，在免疫组化实际操作中遭遇过组织易脱片的问题，今天我将结合一些个人经验，与大家分享简单易操作的解决方法。方法一：使用防脱玻片，组织当然是越新越好。方法二：某些免疫组化染色时候，需要涉及多种抗原修复方法，如某实验需要双修复（热修复和酶修复），热修复相对来说是比较剧烈的（如放在 EDTA 中煮 1 min），沸腾的液体对组织还是有很大的冲击力的，此时组织容易脱，如果热修复放在酶修复后，则组织更容易脱，相反如果将不剧烈的酶修复放在热修复后，可以减少脱片的发生。但很多时候知道这些似乎解决

免疫组化难题集锦（六） 脱片的原因始末以及如何防止脱片

脱片产生的原因和如何防止脱片？（1）多聚赖氨酸玻片质量的问题。我原先是买的，迈新按说也是不错的，可是都脱成什么样子了。后面补做第二批时用的病理科老师自己做的片子，要好一点。（2）组织切的不好，切片机的问题例如比较老的旧的机器切的厚或者不均匀，或者切片者手法不好等。（3）组织的问题，我用的组织癌症的很多，越是癌症组织有坏死之类越容易脱。（4）没烤好，时间短温度不够之类。（5）操作的时候甩的太猛了，有脱片嫌疑的片子最好不甩或轻轻甩，用卫生纸从边缘上慢慢吸水。（6）修复的问题：抗原修复的时候高压时间