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文献和实验家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法
Material and method:Material :1、培养皿、培养瓶、烧瓶、试管等。2、分离组织需要的眼科剪子、眼科镊子。3、5%CO2孵箱、PH计、95%氧气源。4、36电动恒温水浴。5、培养液、各种缓冲液及添加剂DMEM高糖培养基、Hank’s缓冲液 、20%胎牛血清,转换生长因子(TGF-β1)(5ng/mL)、胰岛素-转铁蛋白-硒(10ug/mL胰岛素,5ug/mL转铁蛋白,和0.5ng/mL亚硒酸盐)青霉素100U/Ml,链霉素100U/ml 。6、消化液 胶原
丁香园myl0605的观点:前几天为自己养的PC12是未分化还是分化型困扰,查了一些资料,现发上来希望能给有同样问题的战友有一点帮助!培养条件:PC12细胞培养于铺有鼠尾胶原的玻璃培养瓶中,置于CO2培养箱(37℃,95%空气5%CO2),培养基选用DMEM(pH7.4,高糖),加入10%灭活小牛血清及5%灭活马血清。分化前:PC12细胞在培养基中多呈圆形,直径15~20μm,也有椭圆或多角形的,扁平的细胞少见,倾向于聚集成小团簇状(A图)。分化后:加入NGF后的24h内细胞停止分裂,长出似
一、常规的试剂配制: 1、培养基:选用高糖型DMEM/F12 (1:1)培养基干粉(含15 mmol Hepes),每升培养液中加入碳酸氢钠1.8 g,调节pH值7.0,0.22 μm的微孔滤膜过滤除菌后,加入谷氨酰胺、无菌的青霉素和链霉素液,使其终浓度分别为0.5 mmol/L 、100 U/ml和100 μg /ml,分装后置于4℃保存,临用前加入2%的B27。神经细胞代谢旺盛,选用高糖型培养基;谷胱甘肽可保持培养
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