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文献和实验p 和 miR-150-5p 的表达水平显著升高。 图二 外泌体分离与 WB 检测 图三 外泌体的 miRNA 测序 二、以外泌体 tRNA 为标志物: 四川大学华西医院彭勇课题组发表文章[2],揭示了 tRNA 衍生的小 RNA(tsRNA)在肝癌患者血浆外泌体中显著增加。作者通过小 RNA 测序观察肝癌患者和健康人血浆外泌体中的差异,再通过 RT-qPCR 进行表达验证。 文章发现,肝癌患者血浆外泌体中四种 tsRNAs (tRNA-ValTAC-3、tRNA
我们选取几种常见的样本分别介绍样本处理的要求: 细胞培养上清:选用这种样本的优势是不会受到样本量的限制,但是需要注意以下几点:一是一定不能添加含有外泌体的 FBS;二是细胞一般培养 24-48h 后即可分离外泌体;三是注意细胞不允许有污染、细胞死亡率要控制在 5% 之内。 血清/血浆:选用血液作为样本时,要注意血清和血浆的区别。血清是血液凝固之后收集的液体,如果研究与血小板相关的疾病,选用血清作为样本比较合适;血浆是血液去除了血细胞之后得到的液体,一般情况下选择血浆更合适。尽量在采血 30min
分化、肿瘤侵袭、促血管新生等生理过程,与多种疾病的发生和进程密切相关。 由于外泌体的特殊结构和功能,使得它具有潜在的应用价值,一方面可以作为诊断多种疾病的生物指标,另一方面也可以作为治疗手段,未来有可能作为药物的天然载体用于临床治疗。 三、如何分离外泌体? 外泌体的样本来源主要有细胞培养上清、血清/血浆、尿液、腹水、乳汁、脑脊液、唾液、滑液等,其中细胞培养上清、血清/血浆、尿液是最常见的来源。如果是使用细胞培养上清,要注意细胞培养中一定不能添加 FBS
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