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100 mL
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文献和实验,则生长缓慢,愈伤组织成堆生长。 第二周观察:外周透明部分为衰老细胞,不具分生能力,容易褐化死亡。其特点是细胞呈不规则形,胞质空,核占很小的比例。中央有一定硬度、组织较致密的小白点,为生长点,由分生细胞组成,分生能力很强。其特点是圆形、内含物丰富,核占的比例较大,可见到正在分裂的细胞。 制片步骤: 固定(卡诺固定液固定5-10分钟)→酸解(1N HCL)→水洗→染色(改良苯酚品红染色3-5分钟)→压片→镜检 评分
纤维染色 染色 网状纤维呈黑色或者黑褐色,背景呈棕黄色。 β-半乳糖苷酶染色 染色 β-半乳糖甘酶染色,衰老细胞通常体积变会大,表达pH6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。染色中以X-ga1(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)为底物,在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下,半乳糖苷键被水解生成深蓝色产物,光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。 镀银染色 染色 甘氨酸银又叫镀银。染色将神经突触,神经
,15500×g离心30分钟,取上清,进行蛋白质定量。单向定量电泳取蛋白质分子量标准物,第一次按1∶2稀释后,以后按1∶3倍比例逐级稀释,经4级稀释后,取15μl上样液上样,β-半乳糖苷酶上样量依次分别为1μg、0.24μg、0.062μg、0.0156μg、0.004μg。作12g/L SDS-聚丙烯酰胺凝胶单向电泳,同时电泳4份胶,显色以确定染色灵敏度。双向电泳取300μl样品液沿水化盘中槽的边缘自左向右线性加入,将17cm IPG胶条胶面朝下置于槽中,静置45分钟后覆盖矿物油,在20℃溶胀11~16
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