PI染液

PI染色法（活细胞染色）检测细胞凋亡

染料及试剂 1. 含0.1%TritonX-100的PBS缓冲液（pH7.4） 2. PI染液:将PI（碘化丙啶）溶于含0.1%TritionX-100的PBS中，终浓度为50μg/ml，含RNase 100μg/ml，避光保存。 3. 荧光显微镜 操作方法 制备凋亡细胞悬液，浓度为106 /ml； 取1ml的细胞悬液，加10μl的PI染液混合，作用10min； 加入5ml PBS，1500r/min离心5min，弃上清，重复洗涤2次； 重悬细胞，滴片并用

荧光标记法检测细胞凋亡

一、仪器与试剂 1. TdT酶（25U/μl）； 2. 生物素标记的-dUTP（Biotin-dUTP）或地高辛标记的dUTP （Digoxingening-11-dUTP）1nmol/μl； 3. 反应缓冲液； 4. 洗涤缓冲液； 5. 异硫氰酸荧光素（FITC）标记的亲合素或链霉亲合素 （2.5μg/ml）或抗地高辛抗体（1:30）； 6. PI染液（含PI 5μg/ml及0.1%无DNA酶活性的RNA酶）； 7. PBS缓冲液； 8. 塑料

荧光标记法检测细胞凋亡的操作步骤

); 6. PI染液(含PI 5μg/ml及0.1%无DNA酶活性的RNA酶); 7. PBS 缓冲液; 8. 塑料盖玻片; 9. 贴壁生长的培养细胞; 10. 悬浮生长培养细胞的甩片或涂片;冰冻切片;常规石蜡切片。 二、操作步骤 1. 固定：培养细胞的制片或冰冻切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃冰箱)后，用80%酒精再固定2h(-20℃冰箱);常规4%中性福尔马林固定、石蜡切片进行脱蜡、水合;