watsonNT-A100NEXTY-A100自动移液器10

Caspase活性检测系列（分光光度法）检测原理及操作指南

样本 1） 取50 mg组织置于培养皿中，手术剪剪碎，加入200 μL预冷的裂解液工作液，冰上用玻璃匀浆器匀浆 (组织量加倍时，加入的预冷裂解液也加倍)。 2） 将匀浆好的样本转移到1.5 mL的离心管中，冰浴放置5 min裂解。 3．12,000 rpm在4°C下离心10-15 min。 4．小心地吸取上清转移至新的EP管中，并置于冰上待用。 5．立即测定Caspase的酶活性或者-70°C保存样本，亦可取少量样本用Bradford法[E-BC-K168，详询当地经销商]测定蛋白浓度。 6．Caspase

小鼠腹水及单细胞悬液制备及注意事项

加入适量红细胞裂解液裂解红细胞（可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞，室温裂解 2 min 后，立马加入 10 mL PBS，300 g 离心 5 min 后弃上清）。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养，请注意无菌操作。 收集腹水时，从小鼠左侧（肠道较多）注射 PBS，从右侧（器脏较大）抽腹腔灌洗液，注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱，加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存，但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞，巨噬细胞检测需要封闭Fc受体，此时可使用小鼠 CD16/32纯

ChIP Protocol（Mirmira Lab）

Reagents: ChIP sonication Buffer (1% Triton X-100,0.1% Deoxycholate,50 mM Tris 8.1,150 mM NaCl,5 mM EDTA):10 ml 10% Triton X-1001 ml 10% Deoxycholate5 ml 1 M Tris-Cl pH 8.11 ml 0.5 M EDTA3 ml 5 M NaCl80 ml WaterJust before use,add 10μl Aprotinin,10μ