watsonNT-A20NEXTY-A20自动移液器2-20

【共享】细菌基因组提取方法!

8.0)，-20度保存1小时后，13000rpm离心15min，弃上清液，沉淀用70%乙醇洗2次；置于室温干燥后，溶于50ulTE溶液中，置4oC保存备用。 2 蛋白酶/SDS法制备 先用10ml含适当抗生素的GBM过夜培养Delftia sp.，第二天4000rpm离心10min收集菌体，用Washing TE（50mmol/LTris-HCl pH8.0,10mmol/LEDTA pH8.0）洗菌体2次，之后将菌体充分悬浮在5ml 1×TE缓冲液中，先后加入0.5ml 5mg/L的蛋白

细菌基因组DNA提取方法综述

，氯仿抽提一次后，乙醇沉淀DNA，用自动移液器吸管头将絮状DNA沉淀块吸附到Ep管中，70%乙醇洗2次，干燥后溶于适当1×TE或ddH2O中。 3 1) 细菌培养：细菌接种于5ml液体培养基中，37℃摇床（300rpm）培养过液。 2) 细菌收集：取1ml培养物于1.5ml EP管中，室温8000rpm离心5min，弃上清，沉淀重新悬浮于1ml TE（pH8.0）中（用ddH2O也行)。 3) 菌体裂解：加入6μl 50mg/ml的溶菌酶，37℃作用2h

聚合酶链式反应体外扩增DNA：PCR

    聚合酶链式反应体外扩增 DNA   1.    按以下次序，将各成分加在 0.5 ml 灭菌离心管、扩增管或灭菌滴定板的孔内混合： 10 ×扩增缓冲液                                5 μ l 20 mmol/L 4 种 dNTP 混合液（ pH 8.0 ）            1 μ l 20 μ mol/L 正向引物